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武漢貝科新肽公司(多圖)-湖北白黎蘆醇大腸桿菌表達(dá)方法

武漢貝科新肽科技有限公司

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白藜蘆醇的生物合成主要有兩種途徑：苯丙烷途徑和苯甲酸途徑。苯丙烷途徑：這是白藜蘆醇生物合成的主要途徑。起始物為苯丙氨酸，經(jīng)過(guò)一系列酶的催化作用，如苯丙氨酸首先被苯丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（PAL）催化轉(zhuǎn)化為酸，然后經(jīng)過(guò)酸羧化酶（C4H）和另一種酶的作用，終生成白藜蘆醇。苯甲酸途徑：起始物為苯甲酸，經(jīng)羥化酶的催化作用，生成對(duì)羥基。對(duì)羥基進(jìn)一步被特定的酶催化，終生成白藜蘆醇。

醫(yī)學(xué)領(lǐng)域：白藜蘆醇具有抗’氧化、抗’炎、抗’癌及心’血管保護(hù)等多種生物學(xué)活性，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用潛力。它可以通過(guò)減少心肌缺血、抑制動(dòng)脈粥樣硬化和血’栓的形成、調(diào)節(jié)抗’氧化相關(guān)的酶等多種機(jī)制，發(fā)揮心’血管保護(hù)作用。此外，白藜蘆醇還具有抗腫’瘤活性，可以抑制細(xì)胞色素P450酶及環(huán)氧合酶和蛋白激酶、誘導(dǎo)解’毒酶、拮抗雌激’素受體、促進(jìn)腫’瘤細(xì)胞分化和凋亡等。

轉(zhuǎn)化大腸桿菌：將構(gòu)建好的表達(dá)載體通過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)化、電轉(zhuǎn)化等方法導(dǎo)入大腸桿菌中，并篩選出陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子。優(yōu)化表達(dá)條件：對(duì)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行培養(yǎng)條件的優(yōu)化，包括培養(yǎng)基成分、溫度、pH值、誘導(dǎo)劑濃度等，以提高白藜蘆醇的產(chǎn)量。表達(dá)與檢測(cè)：在優(yōu)化條件下培養(yǎng)大腸桿菌，并檢測(cè)其表達(dá)白藜蘆醇的能力。這可以通過(guò)液相色譜（HPLC）、質(zhì)譜（MS）等方法進(jìn)行檢測(cè)。

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