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貝科新肽科技公司(查看)-GISH

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間，盛濾膜的容器應蓋嚴，以防液體蒸發。

雜交結束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉一次。重復洗一次，同時應避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。

而是對完整的斑馬魚胚胎進行探針雜交及檢測，從整體上把握探針的結合部位，然后對胚胎進行切片，以確定探針結合的具體位置。整胚原位雜交在斑馬魚分子生物學研究中是一種非常重要的實驗方法，原位雜交的探針可以是同位素的探針，用自顯影來檢測；也可以是非同位素的探針，通過熒光或酶法予以檢測。我們這兒所介紹的一種原位雜交的方法是通過后者，以標記探針，然后用酶聯的方法進行檢測。

原位雜交（In Situ Hybridization）是指將特定標記的已知核酸序列為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸序列進行定量定位的過程。這個技術可以用于研究細胞或組織中特定基因或DNA序列的表達和定位，從而幫助研究者深入理解和探究生物學過程。原位雜交有幾種不同的類型，包括熒光原位雜交和其他用于基因表達分析的方法。