武漢貝科新肽科技有限公司
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一. 原位雜交天
1. 重新水化和固定
1） 吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分鐘。
2） 置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘
3） 置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復(fù)一次
4） 置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘
5） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
蛋白酶處理與后固定（本實驗不做此步）
1） 用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理，5體節(jié)到24小時的胚胎處理3分鐘，24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發(fā)育時間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發(fā)育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織，以便于雜交。
2） 用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。
3） 用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。
4） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
原位雜交技術(shù)在其他生物領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用，例如：
植物學(xué)研究：在植物學(xué)研究中，原位雜交技術(shù)可以用于檢測和定位特定基因的表達，研究基因組結(jié)構(gòu)和進化。此外，還可以應(yīng)用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學(xué)研究：在微生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究細菌、病毒等微生物的基因表達和定位，以及它們在環(huán)境中的分布和相互作用。例如，通過標(biāo)記特異性探針，可以檢測腸道微生物群落中的特定，研究其在人體健康和疾病發(fā)生中的作用。
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