原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。
生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子:
基因表達(dá)和調(diào)控研究:原位雜交技術(shù)可以用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機制。例如,可以標(biāo)記特定基因的探針,檢測該基因在不同環(huán)境、不同生長條件下的表達(dá)情況,進而研究其表達(dá)調(diào)控機制。
細(xì)胞分化與發(fā)育研究:在細(xì)胞分化與發(fā)育研究中,原位雜交技術(shù)常被用于檢測和定位特定基因的表達(dá)情況,進而了解細(xì)胞分化的過程和機制。例如,可以標(biāo)記與細(xì)胞分化相關(guān)的基因探針,檢測該基因在不同組織、不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。