原位雜交:
原位雜交是指用特定探針定位、檢測DNA、RNA的一種有效的實驗方法,通過把特點序列客隆到特殊載體上,通過轉錄酶反轉一條天然的RNA探針,將探針和切片樣品進行雜交,通過一系列顯色方法,來確定RNA或者DNA表達區域;本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標記,靈敏度和同位素相當。 我們采用roche標記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進行收費,每個試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費為1萬5千元,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費為1萬9千元。量大優惠!
原位雜交的基本原理是利用標記的核酸探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交,然后通過檢測標記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細胞或組織中確定特定基因或基因組區域的位置和表達水平。
原位雜交可以用于多種類型的實驗。例如,它可以用來檢測特定基因在發育過程中的表達模式,或者確定特定基因變異在細胞中的分布。此外,原位雜交還可以用于診斷疾病,例如某些類型的,以及監測效果。
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個方面:
1. 制備組織樣品:從植物中取出需要研究的組織樣品,如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品:將組織樣品固定在載玻片上,通常使用或乙醇等化學物質進行固定。
3. 處理組織樣品:對固定的組織樣品進行脫水、透明化、脫脂等處理,以便于DNA探針的穿透和結合。
4. 制備DNA探針:根據需要研究的基因序列,設計并合成DNA探針。DNA探針可以標記熒光染料或性同位素,以便于檢測。
5. 雜交DNA探針:將DNA探針與組織樣品進行雜交,通常需要在高溫下進行,以便于DNA探針與RNA或DNA結合。
6. 檢測雜交信號:通過熒光顯微鏡或計數器等設備,檢測DNA探針與RNA或DNA的結合情況,確定目標基因的表達模式和位置。