武漢貝科新肽科技有限公司
自有實驗平臺 真實 高效 品質(zhì)化科研服務
服務熱線
15002786799
原位雜交技術(shù)的原理是什么？有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列，將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件：組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標記物(曾呈奎等2000)。
DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比，DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強度較弱，因此在雜交后的洗滌中不應使用甲醛。
探針特異性至關(guān)重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列，則可據(jù)此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補，那么探針只能與靶序列發(fā)生輕度雜交。這意味著，探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去，可能無法正確檢測。
掃一掃手機網(wǎng)站
在線客服
15002786799
81680037@qq.com