預雜交
1）每個管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。
2）用等體積的HYB＋取代HYB－。
3）60℃水浴，預雜交4小時以上。
雜交
1）吸去預雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..
2）60℃ 溫浴過夜。
注：雜交與預雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結合越好，溫度越高，背景越小。
原位雜交技術還在以下生物領域有應用：
生態學和環境科學：在生態學和環境科學領域，原位雜交技術可以用于研究生物與環境之間的相互作用。例如，通過標記特定基因的探針，可以檢測環境中微生物種群的分布和變化，進而研究其對環境的影響和作用。
進化生物學：在進化生物學領域，原位雜交技術可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關系。例如，通過比較不同物種之間基因序列的差異，可以揭示物種之間的親緣關系和進化歷程。
生物領域應用原位雜交技術的例子：
物種進化與系統發生學研究：在物種進化與系統發生學研究中，原位雜交技術可以用于檢測物種之間的親緣關系和進化歷程。例如，可以比較不同物種之間特定基因序列的差異，進而研究它們的親緣關系和進化歷程。
原位雜交技術在基因表達和調控、細胞分化與發育、研究和物種進化與系統發生學等領域都有廣泛的應用價值，為深入探究生命現象、促進生物技術的發展提供了有力的技術支持。
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