&

GISH-貝科新肽

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產(chǎn)品：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號

咨詢熱線： 15002786799

立即咨詢 QQ咨詢

信息詳情

菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜

（1）在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤，讓濾膜留于原處2-3分鐘。

（2）用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟（1）。

（3）吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復(fù)一次該步驟。

（4）吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。

（5）將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時，固定DNA。

（6）將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進行雜交。

①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達(dá)和基因組進化的研究；②組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位，如EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測；③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測；④基因在染色體上的定位；⑤檢測染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等；⑥分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究，如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些的診斷和生物學(xué)劑量測定等。

原位雜交技術(shù)可以應(yīng)用于以下場景：

組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如，可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA等。

癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測。

檢測染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。

在植物基因組研究中的應(yīng)用。例如，通過與特定基因序列的探針進行雜交，可以在植物染色體上定位到目標(biāo)基因的位置，進而構(gòu)建遺傳圖譜，為植物育種和基因組研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。