預雜交
1）每個管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。
2）用等體積的HYB＋取代HYB－。
3）60℃水浴，預雜交4小時以上。
雜交
1）吸去預雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..
2）60℃ 溫浴過夜。
注：雜交與預雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結合越好，溫度越高，背景越小。
原位雜交技術在其他生物領域也有廣泛的應用，例如：
植物學研究：在植物學研究中，原位雜交技術可以用于檢測和定位特定基因的表達，研究基因組結構和進化。此外，還可以應用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學研究：在微生物學領域，原位雜交技術可以用于研究細菌、病毒等微生物的基因表達和定位，以及它們在環境中的分布和相互作用。例如，通過標記特異性探針，可以檢測腸道微生物群落中的特定，研究其在人體健康和疾病發生中的作用。
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