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武漢貝科新肽(圖)-熒光原位雜交技術(shù)-原位雜交

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號(hào)面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個(gè)不對(duì)稱的標(biāo)記，以使濾膜與性自顯影片位置對(duì)應(yīng)。

用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時(shí)。

底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽(yáng)性雜交信號(hào)的位置，同時(shí)在不對(duì)稱分布點(diǎn)的位置上作出標(biāo)記。可從底片上取下透明紙，通過對(duì)比紙上的點(diǎn)與瓊脂上的點(diǎn)來(lái)鑒定陽(yáng)性菌落。

和其它實(shí)驗(yàn)方法一樣，必須同時(shí)設(shè)對(duì)照試驗(yàn)以證明其實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性。對(duì)照試驗(yàn)的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點(diǎn)是它的高度特異性，它可測(cè)定組織、培養(yǎng)的單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)mRNA，其敏感度可達(dá)到20個(gè)mRNA拷貝/每個(gè)細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性，在用ISHH定位DNA時(shí)很少發(fā)生丟失，降解，其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上，有時(shí)甚至在組織切片上的單個(gè)基因拷貝。正因?yàn)槿绱耍瑢?duì)ISHH結(jié)果的解釋應(yīng)持慎重態(tài)度，特別是前人未報(bào)告過的新發(fā)現(xiàn)。

原位雜交技術(shù)在許多領(lǐng)域都有應(yīng)用，以下是其中幾個(gè)具體應(yīng)用：

細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)：在細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)常被用于研究基因的表達(dá)和定位。例如，通過標(biāo)記特定基因的探針，可以在細(xì)胞或組織中檢測(cè)特定基因序列的存在和分布，進(jìn)而了解基因在細(xì)胞分化、發(fā)育和功能中的作用。

基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究：原位雜交技術(shù)也可用于基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究。例如，通過標(biāo)記多個(gè)基因探針，可以檢測(cè)基因組中的多個(gè)基因序列，從而進(jìn)行基因定位、基因表達(dá)譜分析、基因突變檢測(cè)等研究。

病毒學(xué)和病原微生物研究：在病毒學(xué)和病原微生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位病毒、細(xì)菌等病原微生物。例如，通過標(biāo)記特異性或核酸探針，可以檢測(cè)組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征，從而為疾病的預(yù)防、診斷和提供依據(jù)。

總之，原位雜交技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、基因組學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)和病原微生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象、探究疾病機(jī)制和提供了有力的技術(shù)支持。