&

武漢貝科新肽科技公司(多圖)-GISH

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產(chǎn)品：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號

咨詢熱線： 15002786799

立即咨詢 QQ咨詢

信息詳情

原位雜交雜交液

（一）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。

（二）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。

（三）賈酰胺可使雜交溫度降低，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。

（四）硫酸葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的。

在原位雜交過程中，需要使用標(biāo)記的核酸探針，通常是在性核素或非性物質(zhì)中標(biāo)記的。這些探針可以通過不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，或者通過使用生物信息學(xué)方法設(shè)計和合成新的探針。

在進(jìn)行原位雜交時，細(xì)胞或組織需要固定在適當(dāng)?shù)闹С治锷希巛d玻片。然后，探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交，通常是在加熱條件下進(jìn)行的。接下來，通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強(qiáng)劑，后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。

FISH技術(shù)的基本步驟包括探針制備、樣品預(yù)處理、探針與樣品的雜交、信號檢測和圖像分析等。在探針制備過程中，使用熒光標(biāo)記物代替同位素標(biāo)記物來標(biāo)記探針。在樣品預(yù)處理過程中，細(xì)胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質(zhì)等操作都是必要的，以提高探針與目標(biāo)序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中，探針與樣品中的目標(biāo)序列進(jìn)行互補(bǔ)性雜交，形成可檢測的熒光信號。在信號檢測和圖像分析過程中，使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測熒光信號并獲取高分辨率的細(xì)胞圖像。