貝科新肽(查看)-GISH
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營(yíng)產(chǎn)品:原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
- 公司地址:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)
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FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對(duì)組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平 的分析。熒光標(biāo)記探針不對(duì)環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時(shí)使用多個(gè)探針,縮 短因單個(gè)探針分開使用導(dǎo)致的周期過程和技術(shù)障礙。

原位雜交(In Situ Hybridization)是指將特定標(biāo)記的已知核酸序列為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸序列進(jìn)行定量定位的過程。這個(gè)技術(shù)可以用于研究細(xì)胞或組織中特定基因或DNA序列的表達(dá)和定位,從而幫助研究者深入理解和探究生物學(xué)過程。原位雜交有幾種不同的類型,包括熒光原位雜交和其他用于基因表達(dá)分析的方法。

FISH技術(shù)的基本步驟包括探針制備、樣品預(yù)處理、探針與樣品的雜交、信號(hào)檢測(cè)和圖像分析等。在探針制備過程中,使用熒光標(biāo)記物代替同位素標(biāo)記物來標(biāo)記探針。在樣品預(yù)處理過程中,細(xì)胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質(zhì)等操作都是必要的,以提高探針與目標(biāo)序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中,探針與樣品中的目標(biāo)序列進(jìn)行互補(bǔ)性雜交,形成可檢測(cè)的熒光信號(hào)。在信號(hào)檢測(cè)和圖像分析過程中,使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測(cè)熒光信號(hào)并獲取高分辨率的細(xì)胞圖像。