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武漢貝科新肽(圖)-原位雜交公司-湖北原位雜交

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產(chǎn)品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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信息詳情

原位雜交技術是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細胞內(nèi)待測的核酸復性結(jié)合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位，并通過探針上所標記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。經(jīng)特定標記的核苷酸鏈為探針，可與組織切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交，然后顯示標記物，從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術可研究各種基因在染色體上的定位，編碼某種蛋白質(zhì)的mRNA在胞質(zhì)中的表達。

核酸原位雜交可根據(jù)其檢測物而分為細胞內(nèi)原位雜交和組織切片內(nèi)原位雜交；根據(jù)其所用探針及所要檢測核酸的不同又可分為DNA-DNA, RNA-DNA, RNA-RNA雜交。但不論哪種雜交都必須經(jīng)過組織細胞的固定，預雜交，雜交，沖等一系列洗步驟及自顯影或酶法顯色以顯示雜交結(jié)果。

我們在這兒介紹的是整胚原位雜交，不同于一般的在載片上對細胞和組織切片進行探針雜交及檢測的原位雜交，

原位雜交（In situ hybridazation）

固定

收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養(yǎng)，到達所需要的發(fā)育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后換成，在-20C 保存，待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng)，可阻斷色素的形成)