原位雜交技術的原理是什么?有何用途
原位雜交技術的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000)。
核酸原位雜交可根據其檢測物而分為細胞內原位雜交和組織切片內原位雜交;根據其所用探針及所要檢測核酸的不同又可分為DNA-DNA, RNA-DNA, RNA-RNA雜交。但不論哪種雜交都必須經過組織細胞的固定,預雜交,雜交,沖等一系列洗步驟及自顯影或酶法顯色以顯示雜交結果。
我們在這兒介紹的是整胚原位雜交,不同于一般的在載片上對細胞和組織切片進行探針雜交及檢測的原位雜交,
原位雜交技術還在以下生物領域有應用:
生態學和環境科學:在生態學和環境科學領域,原位雜交技術可以用于研究生物與環境之間的相互作用。例如,通過標記特定基因的探針,可以檢測環境中微生物種群的分布和變化,進而研究其對環境的影響和作用。
進化生物學:在進化生物學領域,原位雜交技術可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關系。例如,通過比較不同物種之間基因序列的差異,可以揭示物種之間的親緣關系和進化歷程。