湖北GISH-武漢貝科新肽科技公司
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營產品:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
- 公司地址:湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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在ISHH,整個實驗周期是比較長的,實驗程序也比較繁雜,而雜交在ISHH整個實驗中可被認為是“短兵相接”的一步。雜交前的一切準備工作如增加組織通透性都是為了在雜交這一步驟中核酸探針能進入細胞或組織與其內的靶核苷酸相結合。因此,雜交是ISHH中關鍵的而且是重要的一個環節。雜交是將雜交液滴于切片組織上,加蓋硅化的蓋玻片,防止孵育過程中的高溫(50℃左右)導致雜交液的蒸發。為保證雜交所需的濕潤環境,可將其放在盛有少量5×SSC或2×SSC(standard saline citrate, SSC)溶液的硬塑料盒中進行孵育。雜交液的成分和預雜交液基本相同,所不同的是加入了標記的核酸探針和硫酸葡聚糖。

根據核酸探針標記物的種類分別進行自顯影或利用酶檢測系統進行不同顯色處理。細胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進行半定量的測定,如自顯影可利用人工或計算機輔助的圖象分析檢測儀(computer-assisted image analysis)檢測銀粒的數量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細胞或組織可利用酶檢測系統顯色,然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數量的核酸的顯色強度進行檢測。

植物原位雜交的應用包括:
研究基因表達:通過觀察熒光信號的位置和數量,可以確定目標基因在植物組織中的表達模式和位置。
染色體定位:將目標基因與染色體中的特定位置進行比較,可以確定目標基因在染色體中的位置和分布。
基因:通過原位雜交技術,可以確定目標基因的序列和位置,為基因提供重要的參考信息。
檢測物種或品種特異性:通過原位雜交技術可以檢測出不同物種或品種之間基因表達的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據。
遺傳育種:通過原位雜交技術可以檢測出不同品種之間基因表達的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。