武漢貝科新肽(圖)-染色體原位雜交-原位雜交
武漢貝科新肽科技有限公司
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RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運(yùn)用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細(xì)胞和組織內(nèi)RNA表達(dá)的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標(biāo)記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細(xì)胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體(Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn),其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠(yuǎn)超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的分子病理學(xué)技術(shù),同時(shí)在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。

原位雜交技術(shù)(in situhybridization)是以標(biāo)記的核酸分子為探針,在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以自顯影或細(xì)胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進(jìn)行探測,從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標(biāo)本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括:
檢測物種或品種特異性:通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種:通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測到不同品種之間基因表達(dá)的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如,通過將特定的外源基因?qū)氲街参锛?xì)胞中,然后利用原位雜交技術(shù)檢測該基因在植物細(xì)胞中的位置和表達(dá)情況,為遺傳育種提供重要的參考信息。