原位雜交第二天
1.
1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。
3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。
4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。
2.
1)用MABT洗兩次,每次五分鐘,放在搖床輕輕搖動。
2)室溫下加1ml 1:2:7溶液,時(shí)間為一小時(shí)。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連,4C 冰箱過夜。
植物染色體原位雜交技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛。例如,它可以用來研究植物基因組的結(jié)構(gòu)和功能,包括基因定位、染色體重組、基因表達(dá)和基因組演化等方面。此外,該技術(shù)還可以用來檢測植物中的染色體異常,如染色體缺失、重復(fù)和易位等。
植物染色體原位雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于它可以直接觀察到染色體上的目標(biāo)DNA序列,而不需要進(jìn)行PCR擴(kuò)增或測序等操作。此外,該技術(shù)還可以同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)DNA序列,從而提高檢測效率和準(zhǔn)確性。