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原位雜交公司-原位雜交-貝科新肽科技公司

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菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜

（1）在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤，讓濾膜留于原處2-3分鐘。

（2）用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復步驟（1）。

（3）吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復一次該步驟。

（4）吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。

（5）將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時，固定DNA。

（6）將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。

原位雜交第二天

1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。

2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。

3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。

4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。

1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動。

2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時間為一小時。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。

原位雜交技術還在以下生物領域有應用：

生態(tài)學和環(huán)境科學：在生態(tài)學和環(huán)境科學領域，原位雜交技術可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如，通過標記特定基因的探針，可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化，進而研究其對環(huán)境的影響和作用。

進化生物學：在進化生物學領域，原位雜交技術可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關系。例如，通過比較不同物種之間基因序列的差異，可以揭示物種之間的親緣關系和進化歷程。

相關的產(chǎn)品和信息有：