原位雜交(In situ hybridazation)
固定
收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養,到達所需要的發育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養,可阻斷色素的形成)
原位雜交是一種生物學技術,它可以在細胞或組織中特定部位檢測DNA或RNA的存在,而不需要將DNA或RNA分離出來。這項技術使用標記的DNA或RNA探針,與細胞或組織中的相應DNA或RNA進行特異性結合,然后通過光學顯微鏡或電子顯微鏡觀察探針的位置和數量。
原位雜交的原理很簡單。DNA或RNA分子具有互補的核苷酸序列,因此可以通過氫鍵相互結合。將標記的DNA或RNA探針與細胞中的DNA或RNA進行雜交,可以特異性地檢測這些探針的位置和數量。探針的數量和位置可以反映DNA或RNA在細胞中的水平和分布。
植物染色體原位雜交技術的應用非常廣泛。例如,它可以用來研究植物基因組的結構和功能,包括基因定位、染色體重組、基因表達和基因組演化等方面。此外,該技術還可以用來檢測植物中的染色體異常,如染色體缺失、重復和易位等。
植物染色體原位雜交技術的優點在于它可以直接觀察到染色體上的目標DNA序列,而不需要進行PCR擴增或測序等操作。此外,該技術還可以同時檢測多個目標DNA序列,從而提高檢測效率和準確性。