原位雜交第三天
1） 用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動，室溫下顯色。
4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
原位雜交的基本原理是利用標記的核酸探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交，然后通過檢測標記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細胞或組織中確定特定基因或基因組區域的位置和表達水平。
原位雜交可以用于多種類型的實驗。例如，它可以用來檢測特定基因在發育過程中的表達模式，或者確定特定基因變異在細胞中的分布。此外，原位雜交還可以用于診斷疾病，例如某些類型的，以及監測效果。
植物染色體原位雜交技術的應用非常廣泛。例如，它可以用來研究植物基因組的結構和功能，包括基因定位、染色體重組、基因表達和基因組演化等方面。此外，該技術還可以用來檢測植物中的染色體異常，如染色體缺失、重復和易位等。
植物染色體原位雜交技術的優點在于它可以直接觀察到染色體上的目標DNA序列，而不需要進行PCR擴增或測序等操作。此外，該技術還可以同時檢測多個目標DNA序列，從而提高檢測效率和準確性。
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