原位雜交(In situ hybridazation)
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收集斑馬魚(yú)的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng),可阻斷色素的形成)
生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子:
基因表達(dá)和調(diào)控研究:原位雜交技術(shù)可以用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。例如,可以標(biāo)記特定基因的探針,檢測(cè)該基因在不同環(huán)境、不同生長(zhǎng)條件下的表達(dá)情況,進(jìn)而研究其表達(dá)調(diào)控機(jī)制。
細(xì)胞分化與發(fā)育研究:在細(xì)胞分化與發(fā)育研究中,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位特定基因的表達(dá)情況,進(jìn)而了解細(xì)胞分化的過(guò)程和機(jī)制。例如,可以標(biāo)記與細(xì)胞分化相關(guān)的基因探針,檢測(cè)該基因在不同組織、不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。