原位雜交第三天
1） 用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動，室溫下顯色。
4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
植物染色體原位雜交是一種重要的分子生物學技術，它可以用來研究植物基因組的結構和功能。該技術利用DNA探針與目標DNA序列的互補性結合，通過熒光或性標記來檢測目標DNA序列在染色體上的位置和數量。
植物染色體原位雜交技術的基本原理是將DNA探針標記上熒光或性同位素，然后將其與目標DNA序列進行雜交。在雜交過程中，探針與目標DNA序列互補結合，形成穩定的雙鏈DNA分子。隨后，通過熒光或性同位素探測技術，可以檢測到目標DNA序列在染色體上的位置和數量。
植物原位雜交除了在遺傳育種方面的應用，還在其他領域有著廣泛的應用，包括：
植物基因研究：植物基因是一種利用基因工程技術來人類遺傳疾病的方法。通過植物原位雜交技術，可以將人類基因導入到植物細胞中，并在植物細胞中表達出相應的蛋白質，為基因提供重要的物質基礎。
植物抗性研究：植物原位雜交技術可以用于研究植物對環境脅迫的抗性機制，例如抗旱、抗鹽、抗病等，有助于了解植物在環境脅迫下的生理和分子響應機制。
植物比較研究：通過植物原位雜交技術可以比較不同植物之間基因表達模式的差異，從而為植物分類和進化研究提供重要的參考依據。
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