原位雜交技術的原理是什么?有何用途
原位雜交技術的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000)。
植物染色體原位雜交技術的應用非常廣泛。例如,它可以用來研究植物基因組的結構和功能,包括基因定位、染色體重組、基因表達和基因組演化等方面。此外,該技術還可以用來檢測植物中的染色體異常,如染色體缺失、重復和易位等。
植物染色體原位雜交技術的優點在于它可以直接觀察到染色體上的目標DNA序列,而不需要進行PCR擴增或測序等操作。此外,該技術還可以同時檢測多個目標DNA序列,從而提高檢測效率和準確性。
熒光原位雜交(FISH)技術具有以下優點:
可多重染色:利用不同的熒光染料標記不同的探針,可以實現多重熒光原位雜交,從而同時檢測多個序列,提高實驗效率了。
高度創新性和性:FISH技術不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。