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原位雜交-貝科新肽(推薦商家)-GISH

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

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信息詳情

雜交　（1）盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2）將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應(yīng)緩緩搖動(dòng)濾膜，防止它們粘在一起。（3）用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片，以降低雜交背景而不影響陽(yáng)性雜交信號(hào)的強(qiáng)度和清晰度。（4）將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時(shí)用68℃，而在50%甲酰胺中雜交時(shí)用42℃）下，預(yù)雜交1-2小時(shí)。

原位雜交第二天

1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。

2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。

3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。

4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。

1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動(dòng)。

2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。

熒光原位雜交（Fluorescence In Situ Hybridization，F(xiàn)ISH）是在性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。

FISH技術(shù)具有許多優(yōu)點(diǎn)，如非性、高特異性、高靈敏度、快速簡(jiǎn)便、可多重染色等。這些特點(diǎn)使得FISH技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，例如用于研究基因表達(dá)、基因組變異和染色體異常等。