GISH-貝科新肽(在線咨詢)
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營產品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
- 公司地址：湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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原位雜交技術是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規則與組織細胞內待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位，并通過探針上所標記的檢測系統將其在核酸的原有位置上顯示出來。經特定標記的核苷酸鏈為探針，可與組織切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交，然后顯示標記物，從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術可研究各種基因在染色體上的定位，編碼某種蛋白質的mRNA在胞質中的表達。
怎樣保證原位雜交實驗操作時的溫度?
建議儀器操作，人工操作的話要注意：
（1）對熒光原位雜交操作過程中可能使用的一些儀器進行溫控檢查，不符合要求的進行更換。
（2）盡可能地保持環境溫度在20度以上。
（3）針對需要預熱以達到要求溫度的試劑，在使用前必須使用溫度計對其進行測溫。
（4）同時檢測的樣本不超過4塊，操作一定要迅速，實驗人員要注意一些小部件的溫度，尤其是在冬季。
這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期，由于核酸分子雜交的特異性高，并可定位，因此該技術已被廣泛應用，例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便；同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸，對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保持組織與細胞的形態，更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。
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